Вправи. Живлення. Дієти. Тренування. Спорт

Дослідження прісноводних риб на зараженість паразитами. Експертиза риби. Експертиза живої, свіжої та охолодженої риби

Дослідження проводять у наступному порядку: шкіра, плавники, ротова порожнина, зябра, очі, кров, серце, черевна порожнина (печінка, селезінка, плавальний міхур, сечовий міхур, жовчний міхур, нирки, статеві залози, кишечник), м'язи, головний та спинний мозок.

Для виявлення трипаноз і криптобій у риби беруть кров із серця і роблять мазки.

Для запобігання зсіданню крові додають 1%-ний розчин лимоннокислого натрію, накривають покривним склом і мікроскопують. Щоб мазок не висихав, краї покривного скла змащують вазеліном. Одночасно кілька мазків крові висушують на повітрі, фіксують у метиловому спирті, фарбують по Романівському - Гімзі або гематоксиліном та мікроскопують.

При огляді шкірного покриву можна побачити пігментовані плями (чорного кольору). У цих місцях у товщі шкіри локалізуються метацеркарії Posthodiplostomum cuticula. На плавцях зустрічаються цисти сисун Bucephalus.

Споровики, деякі інфузорії та личинки сисунів можуть бути і в сполучних утвореннях (горбках); виявити та витягти їх можна тільки після розриву стінки горбка за допомогою препарувальної голки. У кровоносних судинах зябер зустрічаються яйця сангвінікол, суперечки та міцелій гриба.

Серцевиймають разом з великими судинами, поміщають бактеріологічну чашку з фізілогічним розчином, розкривають його порожнини, промивають осад і мікроскопують на наявність збудника сангвініколізу і деяких метацеркаріїв.

Селезінкудосліджують так само, як печінка.

Сечовий міхур. Методика дослідження подібна до дослідженням жовчного міхура. У сечовому міхурі виявляють сисунів, споровиків та інфузорій.

Головний та спинний мозокдосліджують компресорним методом. У цих органах можна виявити суперечників Myxosoma cerebralis Tetrocotyle variegateu.

Хрящі. Для виявлення збудника міксозомозу (вертежу лососевого) компресорним методом досліджують черепні та міжхребцеві хрящі.

Мазкикрові забарвлюють азур-еозином за Романовським - Гімзе Готову фарбу Романовського перед фарбуванням розводять нейтральною водою, що дистилює, з розрахунку 2 - 3 краплі фарби на 1 мл води.

Слизових суперечок забарвлюють 1%-ним водним розчином метиленового синього 30 - 60 хв, потім препарат промивають у воді, послідовно проводять через спирти зростаючої міцності (70, 80, 96% і абсолютний) і просвітлюють ксилолом.

Дрібних цестод можна фарбувати молочнокислим карміном по Блажину. Молочну кислоту розводять у 2 рази дистильованою водою, додають невелику кількість карміну (залежно від бажаного ступеня забарвлення). Рідина кип'ятять. Фарбувати краще свіжі, нефіксовані об'єкти. Тривалість фарбування контролюють під мікроскопом, а у разі перефарбування об'єкт переносять у цільну молочну кислоту для знебарвлення. Забарвлений препарат промивають 20-60 хв водопровідною водою і поміщають у бальзам.

При фарбуванні великих цестодів цей спосіб модифікували. Цестод промивають у проточній або водопровідній воді, що часто змінюється, при кімнатній температурі влітку один день, в холодну пору року - 3-4 дні. Потім їх поміщають на 4-6 год в фарбу (0,3 г карміну на 100 мл 30% молочної кислоти). Інтенсивність фарбування контролюють під мікроскопом. Після цього на добу їх переносять у дистильовану воду, в яку додають 3 краплі розчину сірчанокислого заліза і 2 краплі 1% розчину фенолу. Далі цестод переносять на чисте предметне скло, розправляють та висушують при температурі 30-37°. Висохлий препарат, що дуже щільно пристав до скла, заливають канадським бальзамом або каніфоллю, розчиненою в суміші, що складається з рівних частин хлороформу і абсолютного спирту.

Для приготування тимчасових препаратів нематод не забарвлюють, а кладуть для просвітлення в нерозведену молочну кислоту або лактофенольний розчин (2 частини гліцерину, 1 частина молочної кислоти, 1 частина фенолу та 1 частина води) на 3-10 днів. Дрібних гельмінтів на 1-2 дні поміщають у молочну кислоту (1-2 краплі) та накривають покривним склом.

Постійні препарати для мікроскопічного дослідження нематод готують так. Фіксованих в 70% спирті живих гельмінтів через добу поміщають на кілька годин (залежно від величини нематод) в 96%, а потім в абсолютний спирт на 3-5 хв. Після цього їх переносять у гвоздичне або хеноподієве масло або карбоксилол на 2-5 хв, а потім кладуть на чисте предметне скло і заливають бальзамом.

Скребнів (акантоцефалів) для вивчення хоботка та гачків просвітлюють. Для цього їх з 70% спирту переносять спочатку в 50% гліцерин, а потім в чистий. Структуру інших органів вивчають після повного зневоднення гельмінтів шляхом поступового проведення через спирти зростаючої міцності. З абсолютного спирту гельмінтів переносять на предметне скло в краплю кедрової олії, покривають покривним склом та мікроскопують.


Вступ

1. Огляд літератури

1.2 Біологія збудника

2 Власні дослідження

Висновок


Вступ


Зараження людини і м'ясоїдних відбувається тільки при вживанні в їжу сирої (талої, мороженої, слабопросоленої) та недосмаженої чи непровареної риби.

Метацеркарії опісторхіса зустрічаються в м'язовій тканині озерно-коропових. Озерні (карась, озерний гольян та інших.), і навіть річкові (сырть, вусач та інших.) коропові не заражаються навіть за умов експерименту.

опісторхоз риба ветеринарна експертиза

1. Огляд літератури


1.1 Описторхоз риб та її поширення біля Республіки Казахстан


Своєрідність природних умов Республіки Казахстан, особливості гідрологічного режиму забезпечують стійке функціонування вогнищ опісторхозу. Це зумовлено значною зараженістю риб личинками збудника, великою питомою вагою риб сімейства коропових (короп, лящ, карась, язь, чебак, плотва, лин, сазан) у раціоні харчування населення Північного та Центрального Казахстану, низьким рівнем знань заходів профілактики даного гельмінтозу. Хоча ще 1929 року дослідженнями експедиції під керівництвом К.І. Скрябіна було виявлено широке поширення опісторхозу в басейні Іртиша, дотепер зберігається високий рівень зараженості риб (80,0 - 90,0%) личинками Opisthorchis felineus.

1.2 Біологія збудника


Зрілий опісторх - це плоский черв'як довжиною від 0,2 до 1,2 см і шириною до 0,3 см. Місцем його проживання в організмі господаря є жовчні ходи печінки, жовчний міхур та протоки підшлункової залози.


1.3 Збудник опісторхозу риб та його стійкість до ряду фізичних та хімічних факторів


Метацеркарії у живій рибі зберігають свою життєздатність та інвазійність 5 – 8 років. Дуже стійкі до впливу низьких температур. У замороженій рибі личинки втрачають життєздатність при - 40°C до 7 год, при - 35°C до 14 год, при - 28°C - 32 год. Заморожування риби за вищої температури не гарантує її повного знезараження. Метацеркарії чутливі до високих температур. Після виділення з риби вони гинуть за 55°C протягом 5 хв. При засолюванні, якщо частка солі в рибі дорівнює 14%, а щільність тузлука становить 1,2, метацеркарії виживають у дрібній рибі від 10 до 21 діб (залежно від виду риби), а у великій, довжиною понад 25 см (язи, лящі , ліні), - до 40 діб.

2 Власні дослідження


2.1 Об'єкти, методи та матеріали


Об'єктами дослідження були збудник Opisthorhis felineus, риби із сімейства коропових - карась.

Для виявлення метацеркаріїв у тканинах риби використовувався компресійний. Більш точні результати були отримані при дослідженні всієї поверхневої м'язової тканини риби, яка ретельно відокремлювалася разом із підшкірно-жировою клітковиною від шкіри та плавців.

Компресійний метод. Для компресійного дослідження з метою економії часу досліджували по 5 проб м'язів з підшкірною клітковиною з обох боків риби: по 3 проби зі спинної та 2 із черевної частини м'язів з кожного боку. Кожна проба м'язів бралася з площі 1 – 2 кв. см на глибині 2 – 3 мм.

М'язову тканину, що підлягає дослідженню, подрібнювали і порціями по 1 - 1,5 г розкладали між двома стеклами розміром 6 - 8 х 12 - 15 см.

Готові компресійні препарати переглядали під бінокуляром зі збільшенням у 16 ​​разів. Було знайдено 4 метацеркарії.

2.1.2 Органолептичні методи дослідження


У риб уражених метацеркаріями опісторхозу, зовнішні зміни були відсутні.


2.1.3 Фізико-хімічні методи дослідження

Визначення аміаку. Метод заснований на взаємодії аміаку, що утворюється при псуванні риби, з соляною кислотою та появі при цьому хмарини хлористого амонію.

Проведення аналізу. У широку пробірку наливали 2-3 см3 суміші Ебер, закривали пробкою і струшували 2-3 рази. Виймали пробку з пробірки і відразу ж закривали її іншою пробкою, через яку просунуто тонка скляна паличка із загнутим кінцем. На кінець палички прикріплювали шматочок досліджуваного м'яса риби з близькою температурою до температури повітря в лабораторії в момент проведення аналізу. М'ясо вводили в пробірку так, щоб не забруднити стінки пробірки і щоб воно знаходилося на відстані 1-2 см від рівня рідини.

Опрацювання результатів. Через кілька секунд внаслідок реакції аміаку з соляною кислотою має утворюватися хмарка хлористого амонію. Інтенсивність реакції оцінювали так: - реакція негативна; + реакція слабопозитивна (швидко зникаюча розпливчаста хмаринка); ++ позитивна реакція (стійка хмаринка, що проявляється через кілька секунд після внесення м'яса в пробірку з реактивом); - Н+ реакція різко позитивна (хмара з'являється відразу після внесення м'яса в пробірку з реактивом).

Визначення сірководню. Метод заснований на взаємодії сірководню, що утворюється при псуванні риби, зі свинцевою сіллю з появою темного фарбування внаслідок утворення сірчаного свинцю.

Проведення аналізу. 15-25 г досліджуваного фаршу зі спинної мускулатури риб поміщали пухким шаром у бюкс місткістю 40-50 см3. У бюкс підвішували горизонтально над фаршем смужку щільного фільтрувального паперу, на поверхню якої, зверненої до фаршу, нанесені 3-4 краплі розчину свинцевої солі діаметром 2-3 мм. Відстань між папером та поверхнею фаршу 1 см. Бюксу закривали зверху кришкою, затискаючи фільтрувальний папір між кришкою та корпусом бюкси, і залишали стояти при кімнатній температурі. Паралельно проводили контрольний аналіз без навішування продукту. Після закінчення 15 хв папір знімали і порівнювали його забарвлення з забарвленням паперу, змоченого тим самим розчином свинцевої солі (контрольний аналіз). За наявності у досліджуваному зразку вільного сірководню відбувається побуріння або почорніння ділянок паперу, змочених розчином свинцевої солі.

Інтенсивність реакції позначали так: - реакція негативна; ± сліди фарбування краплі; + реакція слабопозитивна; ++ позитивна реакція (буре фарбування всієї краплі, більш інтенсивне по краях); +++ реакція різко позитивна (інтенсивне темно-буре забарвлення всієї краплі).

Визначення рН. До 5 г фаршу риби м'яса додавали 50 мл дистильованої води і наполягали протягом 30 хв при періодичному перемішуванні, потім пропускали через паперовий фільтр. Фільтрат використовували на дослідження. Визначали рН рН-метром (Hanna рН 211). Враховували, що у риби свіжий фільтрат злегка опалескує (рН до 6,9); у риби сумнівної свіжості фільтрат злегка каламутний (рН 7,0-7,2); у риби несвіжої мутний фільтрат, запах неприємний (рН 7,3 і вище).

Реакція пероксидазу. У бактеріологічну пробірку вносили 2 мл водної витяжки (1: 100) з зябрової тканини і додавали 5 крапель 0,2% спиртного розчину бензидину. Вміст пробірки струшували, після чого вносили дві краплі 1%-ного розчину перекису водню.

2.1.4 Методи визначення хімічного складу риби

Для визначення хімічного складу м'яса риб використовували проби свіжої снулої риби (зі спинної мускулатури карасів двохрічок), виловлених із озера Велике в районі Узинколь.

Визначення масової частки води висушуванням при 100-105 С. Метод заснований на випаровуванні води з продукту при тепловій обробці та визначенні зміни маси його зважуванням.

Наважку спинної мускулатури від 1,5 до 2 г, зважену з абсолютною похибкою не більше 0,001 г, поміщали в чисту висушену і тарированную бюкс зі скляною паличкою, за допомогою якої розподіляли навішування продукту в бюксі рівним тонким шаром. Бюксу закривали притертою кришкою, зважували на аналітичних терезах і висушували в сушильній шафі при 100-105 градусах до постійної маси. Перше зважування проводили через З год після початку сушіння, наступні - через 30-40 хв. Постійна маса вважалася досягнутою, якщо різниця між двома зважуваннями не перевищувала 0,001 г. У бюкс попередньо вносили 5-10 г піску і навішування продукту ретельно перемішували.

Масову частку Х3 у відсотках обчислювали за формулою Х3 = (mrm2) 100/mi-m, де m - маса бюкси з піском г, т - маса бюкси з наважкою і піском до висушування, г; т2 - маса бюкси з наважкою та піском після висушування, р.

За остаточний результат приймали середнє арифметичне результатів двох паралельних визначень, що розбіжності між якими не перевищувало 0,5%.

Визначення масової частки білка за К'єльдалем. Метод заснований на окисленні органічної речовини при спалюванні його в сірчаній кислоті в присутності каталізатора, відгоні аміаку, що утворюється пором, уловлюванні його розчином сірчаної кислоти і визначенні вмісту азоту методом титрування.

Наважку м'язової тканини масою 0,6-1 г зважували з абсолютною похибкою не більше 0,0005 г, поміщали в колбу для спалювання місткістю 100 см, додавали кілька дрібних кристалів мідного купоросу і приливали 10-20 см3 сірчаної кислоти щільністю 1840 кг. Колбу обережно нагрівали у витяжній шафі, не допускаючи розбризкування рідини. Коли вміст колби ставав однорідним, припиняли нагрівання, давали охолонути, додавали 0,5 г сірчанокислого калію і продовжували нагрівання до тих пір, поки рідина в колбі не ставала прозорим, зеленувато-блакитним забарвленням без бурого відтінку. Після закінчення спалювання вміст колби охолоджували і кількісно переносили у відгінну колбу місткістю 500-750 см. Приймачем служила конічна колба місткістю 250-300 см, з 25-30 см сірчаної кислоти 0,05 моль/дм. Кінець трубки холодильника занурювали у розчин сірчаної кислоти. У відгінну колбу обережно, по стінках, уникаючи змішування рідин, приливали 50-70 см розчину гідроксиду натрію 330 г/дм, кидали шматочок лакмусового паперу і швидко закривали її пробкою, з'єднаною за допомогою краплеуловлювача з холодильником, обережно перемішували вміст. Реакція рідини в колбі має бути різко лужною. Після закипання рідини в колбі приймач опускали так, щоб кінець трубки холодильника знаходився на деякій відстані від поверхні розчину і продовжували відгін до тих пір, поки не віджене не менше 2/3 рідини. Кінець відгону визначали по лакмусовому паперу. Якщо відгін закінчено, крапля дистиляту не повинна викликати посиніння червоного лакмусового паперу. Після закінчення відгону кінець трубки холодильника обмивали водою в приймальну колбу і надлишок сірчаної кислоти, що міститься в ній, відтитрували розчином гідроксиду натрію 0,1 моль/дм у присутності метилового червоного. Одночасно проводили контрольний аналіз без навішення досліджуваного зразка.

2.1.5 Санітарно-мікробіологічні методи дослідження

Використовували фарбування розчином розолової кислоти (аурину).

Шматочки м'язів із личинками звільняли від жиру. На тканину наносили краплі трояндової кислоти, а через 2 хв - 0,1 н розчин гідроксиду калію, рівномірно розподіляючи його по тканині. Надлишок рідини з препарату знімали фільтрувальним папером. Накривали покривним склом та мікроскопували. У цих дослідах тканина риби забарвлювалася в рожевий колір, живі личинки зовсім не забарвлювалися; мертві личинки ставали рожевими.

Визначали також шляхом висіву на м'ясопептонний агар у 2 паралельні чашки, визначали шляхом посіву на середовище Кесслер і подальшим пересіванням позитивних проб на щільне диференціальне середовище Ендо; S. Aureus визначали шляхом посіву на сольовий рибопептонний бульйон і наступним пересіванням на елективне середовище - жовтково-сольовий агар; бактерії роду Salmonella визначали при посіві на середовище збагачення (селенітовий бульйон) з подальшим пересіванням у чашки Петрі на щільне диференційно-діагностичне середовище - вісмут-сульфіт агар; бактерії L. monocytogenes визначали шляхом посіву на селективне середовище для попереднього збагачення (бульйон Фразера) та подальшого пересіву на селективно-діагностичне середовище ПАЛ.

Вивчення мікробіологічних показників показало, що з м'яса риби з ІІ понад 51 екз. виділено культуру кишкової палички серотипу О19 в одній пробі, а також відзначено перевищення КМА-ФАнМ в одній пробі, що перевищує допустиму норму СанПіН 2.3.2.1078-01. Виділення умовно-патогенних мікроорганізмів з дослідних проб риб, уражених опісторхозом, мабуть, можна пояснити їх проникненням разом з личинками під час їх проникнення через шкірний покрив риб, їх міграції та у зв'язку з цим ослабленням загальної резистентності організму риб.

2.2 Методи знешкодження риби, ураженої опісторхозом


Теплові обробки є найнадійнішими:

варити рибу протягом 15-20 хвилин із моменту закипання води, шматками трохи більше 150г. (Великі екземпляри розрізати на шматки);

смажити невеликими шматками вагою не більше 100 г. у розпластаному вигляді шкіркою вниз під кришкою на слабкому вогні протягом 20-25 хвилин з кожного боку у рясні кількості масла;

солити дрібну рибу протягом 14 днів, велику (понад 25 см) протягом 40 діб з додаванням 2 кг солі на 10 кг риби, або 200 г солі на 1 кг риби, а при плюсовій температурі з розрахунку 3,5 кг солі на 10 кг риби, але в'ялити2-3 тижні залежно від кліматичних умов (якщо дощова погода - то в'ялити більше 3-х тижнів) з наступним вимочуванням;

в'ялити за смаком із попереднім посолом - протягом 2-х тижнів (в'ялення риби не є способом знешкодження, якщо не витримана технологія засолення);

гаряче копчення за температури 70-80 о протягом 2,5 год, не рекомендується солити та в'ялити язя в домашніх умовах,

використаний обробний інвентар прокип'ятити протягом 3-5 хвилин і добре промити з використанням миючих засобів,

3. Дослідження щодо порівняльної оцінки методів індикації, визначення життєздатності та диференціальної діагностики метацеркарій o. felineus


Варто зазначити також, що більшість із досліджених нами риб були інвазовані іншими метацеркаріями трематод, а саме: Paracaenogonimus ovatus (сім. Prohemistomidae), Bolbophoras confiisus (сім. Posthodiplostomidae).

Видову приналежність метацеркарій визначали за Судариковим В.Є. (2002). Їх треба диференціювати виходячи з анатомо-морфологічних ознак, маючи на увазі, що до наших досліджень не вказувалося на наявність цих трематод. Принцип диференціації зазначених видів трематод заснований на будові метацеркарій, розміру та формі цист, розміру та формі метацеркарій, звільнених із цисти.

При виявленні личинок у рибі, зокрема в оцінці ефективності її знезараження, необхідно визначати їх життєздатність. Нами проведено порівняльну оцінку низки методів визначення життєздатності личинок опісторхісів.

За морфологічними ознаками. Метацеркарій трематод, виділених з тканин риби за допомогою препарувальної голки, поміщали в краплю теплої води або фізрозчину (37-40 градусів) на предметне скло, накривали покривним склом та досліджували під малим та великим збільшенням мікроскопа. Явне порушення цілості оболонок цист, грубі зміни внутрішньої будови личинки, розпад її вмісту, руйнування екскреторного міхура є ознаками загибелі метацеркарій. Відсутність зазначених показників свідчить про наявність живих личинок.

Метод механічної дії. Як відомо, метацеркарій мають здатність здійснювати рухи, перебуваючи в цисті. Наявність навіть найслабших самостійних рухів личинки свідчить про її життєздатність. У зв'язку з цим рух личинок стимулювали слабким придушенням метацеркарій покривним склом.

Метод хімічної дії. Викликати рух личинок можна жовчю тварин або трипсину. На виділені метацеркарії наносили кілька крапель хімічного реагенту так, щоб повністю покрити личинок. Для прискорення ексцистування предметне (годинне) скло з личинками трохи підігрівали над полум'ям спиртування. Через кілька секунд під впливом хімічного подразника починався вихід личинок з цист та їх активний рух, що слугувало показником життєздатності. Процес ексцистування личинок контролювали під мікроскопом. За відсутності протягом 30 хв будь-якої рухової реакції слід враховувати як загибель личинок.

Висновок


Проведеними дослідженнями визначено, що відсоток виявлення метацеркарій у різних групах м'язів неоднаковий і становить у середньоспинних м'язах – 51,52%, переднеспинних – 28,84%, верхньохвостових 15,94%, грудних – 1,52%, черевних – 1,33% та нижньохвостових – 0,85%.

Встановлено, що опісторхоз риб може протікати як моноінвазія, так і в змішаній формі (у більшості випадків) з ураженням метацеркаріями інших трематод, що необхідно враховувати при постановці діагнозу на опісторхоз.

При зовнішньому огляді та патологоанатомічному дослідженні риб, уражених опісторхозом, клінічних симптомів хвороби та видимих ​​патологічних змін в органах та тканинах не відзначається, за винятком відставання у зростанні на 7,4% та зменшенні маси тіла на 1,5% у риб з високою інтенсивністю інвазії у порівнянні зі здоровою, а також наявності дегенеративних змін у вигляді зернистої дистрофії невеликих ділянок м'язової тканини з втраченою поперечною смугастістю та розростанням сполучної тканини навколо метацеркарій.

Встановлено, що за органолептичним та фізико-хімічним показниками м'ясо риб, уражених опісторхозом, знаходиться в межах вимог до доброякісної риби та не залежить від її інтенсивності інвазії.

За результатами санітарно-мікробіологічного дослідження м'ясо риб з низькою та середньою інтенсивністю інвазії відповідають вимогам існуючих нормативів вмісту мікрофлори, а за високої інтенсивності відмічено перевищення рівня вмісту кишкової палички.

При вивченні хімічного складу м'яса риб, уражених опісторхозом, виявлено залежність, що чим вище інтенсивність інвазії, тим більший вміст вологи в ньому і тим менше білка, жиру, золи, кальцію та фосфору і нижче калорійність, що вказує на нижчу енергетичну цінність, особливо м'яса риб із високою ІІ (87,17 ккал) у порівнянні зі здоровою рибою.

Проведеними дослідженнями визначено тенденцію достовірного зниження відносної біологічної цінності (на 2,7%) м'яса риб, уражених опісторхозом, за високого ступеня інвазії.


Список використаної літератури


Артем'єва С.А. та ін. Мікробіологічний контроль м'яса тварин, птиці, яєць та продуктів їх переробки. М.: Колос, – 2003 р. – 288 с.;

Білоусов В.І. Нагляд за безпекою у ветеринарному плані продуктів аквакультури. Збірник "Епізоотичний моніторинг в аквакультурі: стан та перспективи". – М.: – 2005 р. – 100 с.;

Беер С.А. Біологія збудника опісторхозу. М. – КМК. - 2005р. - 336с.;


Репетиторство

Потрібна допомога з вивчення якоїсь теми?

Наші фахівці проконсультують або нададуть репетиторські послуги з цікавої для вас тематики.
Надішліть заявкуіз зазначенням теми прямо зараз, щоб дізнатися про можливість отримання консультації.


Дослідження проводять у наступному порядку: шкіра, плавники, ротова порожнина, зябра, очі, кров, серце, черевна порожнина (печінка, селезінка, плавальний міхур, сечовий міхур, жовчний міхур, нирки, статеві залози, кишечник), м'язи, головний та спинний мозок.

Для виявлення трипаноз і криптобій у риби беруть кров із серця і роблять мазки.

для запобігання згортанню крові додають 1%-ний розчин лимоннокислого натрію, накривають покривним склом і мікроскопують. Щоб мазок не висихав, краї покривного скла змащують вазеліном. Одночасно кілька мазків крові висушують на повітрі, фіксують у метиловому спирті, фарбують по Романівському - Гімзі або гематоксиліном та мікроскопують.

При огляді шкірного покриву можна побачити пігментовані плями (чорного кольору). У цих місцях у товщі шкіри локалізуються метацеркарії Posthodiplostomum cuticula. На плавцях зустрічаються цисти сисун Bucephalus.

Споровики, деякі інфузорії та личинки сисунів можуть бути і в сполучних утвореннях (горбках); виявити та витягти їх можна тільки після розриву стінки горбка за допомогою препарувальної голки. У кровоносних судинах зябер зустрічаються яйця сангвінікол, суперечки та міцелій гриба.

Серцевиймають разом з великими судинами, поміщають бактеріологічну чашку з фізілогічним розчином, розкривають його порожнини, промивають осад і мікроскопують на наявність збудника сангвініколізу і деяких метацеркаріїв.

Селезінкудосліджують так само, як печінка.

Сечовий міхур. Методика дослідження подібна до дослідженням жовчного міхура. У сечовому міхурі виявляють сисунів, споровиків та інфузорій.

Головний та спинний мозокдосліджують компресорним методом. У цих органах можна виявити суперечників Myxosoma cerebralis Tetrocotyle variegateu.

Хрящі. Для виявлення збудника міксозомозу (вертежу лососевого) компресорним методом досліджують черепні та міжхребцеві хрящі.

У місцевостях, неблагополучних по гельмінтозоонозам риб, проводять вибіркове дослідження окремих екземплярів на личинки лентеца широкого і трематоди - опісторхіс (котячої двоустки) і метагонімусу. Принагідно встановлюють зараженість риби та іншими паразитами.

У зябрах (рідше зовнішніх покривах) прісноводних риб мешкає рачок ергазилюс. Рачки схожі на білі крупинки. У уражених зябрах виявляють крововиливи та ділянки некротичного розпаду.

Слизові оболонки в зябрах, підшкірній клітковині та внутрішніх органах (печінка, нирки) риб утворюють цисти, що мають вигляд білих крупинок. Вони сягають величини 1-5 мм.

Для дослідження на метацеркарії метагонімусу шматочки плавників, зябер або луску поміщають між предметним склом і переглядають при малому збільшенні мікроскопа. Метацеркарії метагонімусу овальної або кулястої форми, діаметр їх 0,18-0,21 мм. Личинки мають злегка підкову форму, оточені цистою.

Внутрішні органи риб, хворих на лігулоз, здавлені та анемічні.



Метацеркарії опісторхісу являють собою інкапсульовані цисти овальної форми довжиною близько 0,3 мм і шириною близько 0,24 мм. Вони локалізуються переважно у підшкірній частині спинних м'язів. Для дослідження на личинки опісторхіса вирізують 2-3 скибочки м'язів товщиною 2-3 мм, здавлюють між предметними стеклами і переглядають під малим збільшенням мікроскопа. Характерна відмінність личинки опісторхіса - наявність усередині цисти черв'ячка - адолескарія з двома присосками і великої чорної зернистої плями.

Рибу, уражену плероцеркоїдами лентеца широкого та метацеркаріями опісторхісу, проварюють протягом 30 хвилин або використовують для приготування консервів. Допускається знешкоджувати таку рибу та заморожуванням: при ураженні "плероцеркоїдами лентеця широкого рибу витримують у холодильних камерах при температурі -8° протягом семи діб або при -12° - три доби; при ураженні метацеркаріями опісторхісу рибу проморожують до температури не вище - 15°і витримують щонайменше 14 діб.

Завдання 3. Провести санітарне дослідження ікри.

План роботи: 1) дослідити ікру органолептично;

2) визначити в ікрі вміст вологи;

3) визначити в ікрі вміст кухонної солі;



4) дослідити ікру наявність піску;

5) дослідити ікру на олово та свинець (це дослідження можна опустити);

6) визначити в ікрі вміст нітратів;

7) визначити в ікрі кількість летких основ;

8) визначити в ікрі кислотне число;

9) дати висновок про сортність ікри та її санітарну якість.

Обладнання та реактиви:проби ікри різної якості; ваги технічні з різноважками; шпателі; шафа сушильна; бюкси з піском; порцелянові чашки; тиглі; фільтри; колби мірні на 100 мл та 500 мл; колби конічні; прилад для відгону летких речовин; ступки з маточками; хімічні пробірки; азотнокисле срібло, 0,1 N розчин (у бюретці); калій хромовокислий; соляна кислота 10%-на; оцтова кислота 5%-на; хлористий неочищений натрій; стандартна шкала визначення нітратів (див. у тексті); дифеніламін у сірчаній кислоті (див. у тексті); сірчана кислота концентрована; суміш спирту з ефіром 1:2; фенолфтаміл 1%-ний; калій їдкий О, IN.

Дослідження проводять у наступному порядку: шкіра, плавники, ротова порожнина, зябра, очі, кров, серце, черевна порожнина (печінка, селезінка, плавальний міхур, сечовий міхур, жовчний міхур, нирки, статеві залози, кишечник), м'язи, головний та спинний мозок.

Для виявлення трипаноз і криптобій у риби беруть кров із серця і роблять мазки.

Для запобігання зсіданню крові додають 1%-ний розчин лимоннокислого натрію, накривають покривним склом і мікроскопують. Щоб мазок не висихав, краї покривного скла змащують вазеліном. Одночасно кілька мазків крові висушують на повітрі, фіксують у метиловому спирті, фарбують по Романівському - Гімзі або гематоксиліном та мікроскопують.

При огляді шкірного покриву можна побачити пігментовані плями (чорного кольору). У цих місцях у товщі шкіри локалізуються метацеркарії Posthodiplostomum cuticula. На плавцях зустрічаються цисти сисун Bucephalus.

Споровики, деякі інфузорії та личинки сисунів можуть бути і в сполучних утвореннях (горбках); виявити та витягти їх можна тільки після розриву стінки горбка за допомогою препарувальної голки. У кровоносних судинах зябер зустрічаються яйця сангвінікол, суперечки та міцелій гриба.

Серцевиймають разом з великими судинами, поміщають бактеріологічну чашку з фізілогічним розчином, розкривають його порожнини, промивають осад і мікроскопують на наявність збудника сангвініколізу і деяких метацеркаріїв.

Селезінкудосліджують так само, як печінка.

Сечовий міхур. Методика дослідження подібна до дослідженням жовчного міхура. У сечовому міхурі виявляють сисунів, споровиків та інфузорій.

Головний та спинний мозокдосліджують компресорним методом. У цих органах можна виявити суперечників Myxosoma cerebralis Tetrocotyle variegateu.

Хрящі. Для виявлення збудника міксозомозу (вертежу лососевого) компресорним методом досліджують черепні та міжхребцеві хрящі.

Мазкикрові забарвлюють азур-еозином за Романовським - Гімзе Готову фарбу Романовського перед фарбуванням розводять нейтральною водою, що дистилює, з розрахунку 2 - 3 краплі фарби на 1 мл води.

Слизових суперечок забарвлюють 1%-ним водним розчином метиленового синього 30 - 60 хв, потім препарат промивають у воді, послідовно проводять через спирти зростаючої міцності (70, 80, 96% і абсолютний) і просвітлюють ксилолом.

Дрібних цестод можна фарбувати молочнокислим карміном по Блажину. Молочну кислоту розводять у 2 рази дистильованою водою, додають невелику кількість карміну (залежно від бажаного ступеня забарвлення). Рідина кип'ятять. Фарбувати краще свіжі, нефіксовані об'єкти. Тривалість фарбування контролюють під мікроскопом, а у разі перефарбування об'єкт переносять у цільну молочну кислоту для знебарвлення. Забарвлений препарат промивають 20-60 хв водопровідною водою і поміщають у бальзам.

При фарбуванні великих цестодів цей спосіб модифікували. Цестод промивають у проточній або водопровідній воді, що часто змінюється, при кімнатній температурі влітку один день, в холодну пору року - 3-4 дні. Потім їх поміщають на 4-6 год в фарбу (0,3 г карміну на 100 мл 30% молочної кислоти). Інтенсивність фарбування контролюють під мікроскопом. Після цього на добу їх переносять у дистильовану воду, в яку додають 3 краплі розчину сірчанокислого заліза і 2 краплі 1% розчину фенолу. Далі цестод переносять на чисте предметне скло, розправляють та висушують при температурі 30-37°. Висохлий препарат, що дуже щільно пристав до скла, заливають канадським бальзамом або каніфоллю, розчиненою в суміші, що складається з рівних частин хлороформу і абсолютного спирту.

Для приготування тимчасових препаратів нематод не забарвлюють, а кладуть для просвітлення в нерозведену молочну кислоту або лактофенольний розчин (2 частини гліцерину, 1 частина молочної кислоти, 1 частина фенолу та 1 частина води) на 3-10 днів. Дрібних гельмінтів на 1-2 дні поміщають у молочну кислоту (1-2 краплі) та накривають покривним склом.

Постійні препарати для мікроскопічного дослідження нематод готують так. Фіксованих в 70% спирті живих гельмінтів через добу поміщають на кілька годин (залежно від величини нематод) в 96%, а потім в абсолютний спирт на 3-5 хв. Після цього їх переносять у гвоздичне або хеноподієве масло або карбоксилол на 2-5 хв, а потім кладуть на чисте предметне скло і заливають бальзамом.

Скребнів (акантоцефалів) для вивчення хоботка та гачків просвітлюють. Для цього їх з 70% спирту переносять спочатку в 50% гліцерин, а потім в чистий. Структуру інших органів вивчають після повного зневоднення гельмінтів шляхом поступового проведення через спирти зростаючої міцності. З абсолютного спирту гельмінтів переносять на предметне скло в краплю кедрової олії, покривають покривним склом та мікроскопують.

Сподобалася стаття? Поділіться з друзями!
Чи була ця стаття корисною?
Так
Ні
Дякую за ваш відгук!
Щось пішло не так і Ваш голос не був врахований.
Дякую. Ваше повідомлення відправлено
Знайшли у тексті помилку?
Виділіть її, натисніть Ctrl+Enterі ми все виправимо!